培養皿的正確儲存和使用方法是什么
儲存條件與規范
培養皿的儲存需根據材質和滅菌狀態采取不同策略。?玻璃培養皿?長期儲存應保持干燥環境,溫度控制在10-25℃之間,相對濕度不超過60%,避免陽光直射導致玻璃老化?。未滅菌的玻璃皿建議用牛皮紙包裹后存放,而已滅菌產品需在潔凈柜中保存,有效期通常為2周?。?塑料培養皿?需特別注意溫度上限,聚苯乙烯(PS)材質儲存溫度不得超過50℃,聚丙烯(PP)材質可耐受60℃,所有塑料培養皿均應避光保存,防止材料降解?。
預滅菌一次性培養皿的儲存需嚴格遵守:
冷鏈管理?:未拆封產品應2-8℃冷藏,保持培養基活性(有效期通常6-12個月)?
溫度恢復?:使用前需室溫平衡30分鐘,防止冷凝水影響微生物生長?
包裝完整?:僅在使用時拆開無菌包裝,已開封未使用的培養皿建議24小時內用完?
滅菌處理標準流程
不同材質的培養皿適用不同的滅菌方法:
玻璃培養皿滅菌?
預處理?:用熱水沖洗后,1-2%鹽酸浸泡去除堿性殘留,蒸餾水沖洗干凈?
干熱滅菌?:160-170℃保持1-2小時,滅菌后溫度需自然降至60℃以下開箱?
高壓蒸汽滅菌?:121℃維持15-30分鐘,適合急需使用的情況?
塑料培養皿滅菌?
出廠預滅菌:γ射線或環氧乙烷(EO)滅菌,無菌保證水平SAL需達10???
實驗室處理:僅限特定耐高溫材質(如PP)可121℃高壓滅菌15分鐘?
使用操作關鍵要點
培養基制備階段?
傾倒溫度控制在45℃左右,避免燙死微生物或過早凝固?
培養基厚度:標準90mm培養皿建議倒入15-20ml,形成3-4mm均勻層?
凝固方式:水平靜置至凝固,避免震動或傾斜導致厚度不均?
接種操作規范?
無菌操作:超凈臺或生物安全柜中進行,動作幅度控制在皿蓋開角≤45°?
采樣技術:接觸法施壓3-5秒(0.25-0.35kg/cm2壓力),劃線法需保持劃線間距2-3mm?
時間控制:從開蓋到完成接種不超過15秒,減少環境微生物污染風險?
培養階段注意事項?
放置方式:細菌培養需倒置,防止冷凝水滴落;霉菌培養應正置避免孢子擴散?
環境控制:細菌培養箱溫度精度需±1℃,特殊要求±0.5℃?
堆疊限制:培養皿堆疊不超過15層,確保氣體交換和溫度均勻?
質量控制與偏差處理
日常質控措施?
滅菌驗證?:每月用生物指示劑(如嗜熱脂肪芽孢桿菌)驗證滅菌效果?
空白對照?:每批次培養基需做空白培養,檢查無菌狀態?
表面檢查?:使用前觀察皿底平整度(公差≤0.1mm)和有無裂紋?
常見問題解決方案?
冷凝水過多?:預溫培養皿至培養基溫度±2℃范圍?
菌落分布異常?:檢查培養箱水平度和平板傾倒均勻性?
邊緣污染?:確認操作區域潔凈度(建議定期甲醛熏蒸)?
特殊檢測場景調整?
厭氧培養:使用雙層蓋培養皿,內蓋含鈀催化劑,轉移時間控制在30秒內?
高溫環境:選擇聚碳酸酯(PC)材質,短期耐受135℃?
長期觀察:黑色PP培養皿可抑制雜菌生長,適合7-10天霉菌培養
注:以上資料僅供參考,完整操作請以實說明為準,不同品牌可能存在細節差異?。
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