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逆轉錄
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Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉錄產品信息
產品名稱
產品編號
規格
儲存
Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
HRF0194
100 T
-20℃
產品描述
HRbio™ Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉錄是基于HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase開發的試劑盒。與HRbio™ M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase熱穩定性大幅度提高,可耐受高達50℃的反應溫度,適合具有復雜二級結構的RNA模板的逆轉錄。同時,該酶增強了與模板的親和力,適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉錄。HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase合成全長cDNA的能力也有了提升,可擴增長達10 kb的cDNA。 試劑盒中包含由總RNA或mRNA合成高鏈cDNA所需的所有成分,并提供兩種cDNA合成引物:Random Primers N6和oligo (dT)18,合成的單鏈cDNA產物可直接用來進行后續PCR或者qPCR反應。
產品組分
編號
組分
產品編號/規格
HRF0194 (100 T)
HRF0194-A
RNase-free H2O
2×1 mL
HRF0194-B
5×HRbio™ Ⅱ Buffer
400 μL
HRF0194-C
HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix
200 μL
HRF0194-D
Oligo (dT)18 (50 μM)
100 μL
HRF0194-E
Random Primers N6 (50 μM)
【注】:
1)5×HRbio™ Ⅱ Buffer中包含dNTP。
2)HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix中包含RNase inhibitor。
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存。
注意事項
1)反應液的配制應在冰上操作完成,操作過程應避免RNase污染;
2) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3)本產品僅作科研用途!Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉錄
鏈cDNA合成操作步驟
1. 逆轉錄反應體系配制(20 μL體系)
使用量
To 20 μL
Total RNA
1 ng -5 μg*
or mRNA
1 ng-500 ng*
4 μL
1 μL
or Oligo (dT)18 (50 μM)
or 1 μL
or Gene Specific Primers (2 μM)
2 μL
【可省略】:若后續實驗為PCR,針對復雜模板,可將RNA、H2O、反轉錄引物在65℃孵育5 min 后,迅速冰上冷卻,然后再加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix;若后續實驗為qPCR,則可省略65℃孵育步驟,直接在體系中加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix。
【注】:若后續實驗為qPCR,建議Total RNA 或 mRNA投入量不超過1 μg或100 ng,如果目的基因的表達豐度非常低,最多可投入5 μg Total RNA或500 ng mRNA。
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