產品信息

產品描述

HRbio™ Probe qPCR Mix hUDG 是一款適用于DNA模板(如DNA病毒)的探針法qPCR DNA 聚合酶，以其的定量性被廣泛應用，并能有效的防止污染，核心組分Taq HS DNA Polymerase是基于抗體法修飾，經過升級改造提升模板親和能力的新一代熱啟動DNA聚合酶。

產品組分

a、內含dUTP 及含鎂離子 buffer.    

b、內含 AB-HS Taq DNA polymerase

運輸與保存方法

-20 ℃,保質期1年。

產品特點

1、qPCR反應；

2、高特異性和高靈敏度。

體系配制（以50μL反應體系為例）

注： 1、引物一般在 0.1μM-1μM 之間進行調整，一般情況下引物濃度在 0.2μM可達到理想的檢測效果；

2、探針濃度一般在 50nM-250nM 質檢進行調整；

3、擴增片段的長度一般在 80bp-150bp 之間。

反應條件

注：1、預變性時間設置：由于本試劑用到的是抗體修飾酶，需要熱激活處理，一般建議預變性時間設為 95℃，3min。

• 退火溫度和時間設置：請根據引物的 Tm 值和目的基因的長度進行調整。

熱啟動探針法定量PCR Mix

結果分析

1.擴增結束無擴增曲線

1）建議加入高濃度和高質量的 DNA 模板確保反轉的成功；

2）引物是否降解，可以通過PAGE 膠確定其完整性；

3）反應循環數不夠，一般將循環數設為 40-45 個循環；

4）確認PCR 程序設置中是否設置了熒光采集過程。

2.CT 值出現過晚

1）反應條件不夠優化，可適當降低退火溫度；

2）模板濃度過低或加樣量不足；

3）PCR 產物過長，一般PCR 產物推薦長度為 80-150bp。

3.陰性對照有明顯擴增

1）Mix 液、ddH2O、引物和探針可能存在污染，更換新的重新進行實驗。

注意事項

本產品僅供科研用途！